药物研发CRO/CDMO
IVT mRNA合成是整个mRNA制备过程中的核心环节,体外转录所用的质粒模板、转录和修饰工艺、质量控制等至关重要。
通用生物拥有专业的技术团队,在科研及临床前用RNA定制合成方面具有丰富的经验,可提供基因合成、质粒制备、质粒线性化、mRNA体外合成与纯化及mRNA质控等一站式服务。 利用体外转录方式制备各种长度及功能的mRNA,并可针对不同的下游应用进行优化定制, 如模板优化、编码区密码子优化、核苷修饰及转录后修饰等,体外转录mRNA可应用于细胞 转染、胚胎注射、体外翻译、mRNA疫苗和药物开发等研究领域。
♢ 服务优势
♢ 服务内容
服务步骤 | 服务内容 | 周期 | 交付内容 | ||
---|---|---|---|---|---|
基因合成及质粒制备 | 基因合成、质粒构 | 2-3周 |
a)质粒测序结果 b)mRNA合格样品 c)质检及项目报告 |
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质粒抽提 | |||||
mRNA体外合成(IVT) |
酶切线性化 | 3-4周 | |||
体外转录加帽加尾 | |||||
质量控制(QC) | 默认QC+额外QC项(可定制 |
详 询 |
♢ QC项目
默认项目 | 额外(可选) |
---|---|
外观 | polyA加尾效率 |
mRNA序列长度 | 加帽效率 |
序列准确性 | 模板DNA残留 |
RNA浓度 | 蛋白残留 |
A260/280 | RNA酶残留 |
纯度 | dsRNA检测 |
- | 内毒素含量 |
- | 生物负载 |
* 需支付额外QC费用。如需更多其它QC项,可支持定制
♢ 案例展示
mRNA体外转录
使用T7 RNA聚合酶进行体外转录,可高效制备长达5 kb的mRNA
图1. 不同长度mRNA琼脂糖凝胶电泳图 图2. 合成的200 nt mRNA电泳图
mRNAmRNA纯度检测
无论线性质粒模板或者PCR产物为模板,合成mRNA纯度均在90%以上
图3. 线性质粒模板:100 nt mRNA纯度检测
图4. PCR产物模板:100 nt mRNA纯度检测
mRNAmRNA加帽检测(LC-MS)
图5. 未加帽(左)与加帽(右)的mRNA分子量
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